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        發布時間:2021-10-20 06:23:34

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        羊棘球蚴(包蟲)病ELISA抗體檢測試劑盒
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        羊棘球蚴(包蟲)病ELISA抗體檢測試劑盒

        羊棘球蚴(包蟲)ELISA抗體檢測試劑盒??IndirectELISAKitForEchinococcusGranulosus??使用說明書【簡介】  試劑盒由抗原包被板、血清稀釋板、酶標二抗及其它試劑制成,應用間接ELISA法檢測羊血清中抗羊棘球蚴(包蟲)主要保護性抗原Eg95蛋白的抗體?!居猛尽俊 ∵m用于養殖場及檢驗機構對羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗免疫效果的評價?!驹怼俊 ”驹噭┖惺遣捎眉蝌手饕Wo性抗原EG95包被微孔板。在試驗中,若待測血清樣品中含有抗棘球蚴的特異性抗體,則將與檢測板上抗原結合形成抗原—抗體復合物。之后加入的酶標二抗將與檢測板上的抗原—抗體復合物發生特異性結合,再加入TMB底物溶液后形成藍色產物。顯色反應經終止液終止后呈黃色,最終通過測定450nm波長下吸光度即可得到結果?!驹噭┖兄饕煞帧?1?抗原包被板??????????????????2塊????????????????????????????96孔/塊2?陰性對照血清???1管????????????????????????????50μl?/管3?陽性對照血清????1管????????????????????????????50μl?/管4?酶標二抗???2管???????????????????????????0.2ml/管5?25倍濃縮洗滌液?????1瓶????????????????????????????25ml/瓶6?底物溶液A??????????1瓶????????????????????????????10ml/瓶7?底物溶液B?????????1瓶????????????????????????????10ml/瓶8?終止液????????????1瓶????????????????????????????10ml/瓶9?樣品稀釋液????2瓶????????????????????????????30ml/瓶10血清稀釋板??????2塊????????????????????????????96孔/塊11說明書???????????????1張?【樣品制備】  取動物全血,按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血?!驹噭┡渲啤俊 ∈褂们?,試劑盒內除酶標二抗外的各種試劑都應恢復到室溫(25?C左右)。25倍濃縮的洗滌液恢復至室溫或略微加熱后搖動使沉淀的鹽溶解,然后用去離子水作25倍稀釋,稀釋好的洗滌液在2~8?C可以存放7天。酶標二抗在使用前用樣品稀釋液按1:100倍稀釋,現配現用?!緲悠废♂尅俊 藴蕵悠放c待檢樣品均在血清稀釋板中按1:50倍的體積稀釋(推薦稀釋方法:245μL樣品稀釋液中加5待檢血清樣品)?!静僮鞑襟E】?1、取抗原包被板,先加入50μL樣品稀釋液,再將稀釋好的待檢樣品和對照樣品各取50μL加入到抗原包被板孔中,用移液器輕輕吹打混勻。陰性對照和陽性對照各設2孔,置37?C溫育30分鐘。2、甩掉板中的溶液,每孔加入稀釋好的洗滌液200μL,靜置1分鐘倒掉,再在吸水紙上拍干,共洗3次。3、每孔加入稀釋好的酶標二抗100μL,置37?C溫育30分鐘。4、甩掉板中的溶液,每孔加入稀釋好的洗滌液200μL,靜置1分鐘倒掉,再在吸水紙上拍干,共洗3次。5、每孔加入等體積混合好的底物溶液A與底物溶液B100μL,避光顯色10分鐘。6、每孔加終止液50μL,10分鐘內測定450nm波長吸光度?!窘Y果判定】?  參考農業部關于印發《2013年國家動物疫病強制免疫計劃》的通知,被檢抗體正向間接血凝實驗抗體效價≥25為陽性。根據該通知制定結果判定標準:?1實驗結果同時滿足下列條件,方為有效:標準陽性對照孔平均OD450nm≥0.6±0.02。標準陰性對照孔平均OD450nm≤0.3±0.02。2疫苗免疫后抗體水平檢測結果的判定:樣品OD450nm≤0.3,判為細粒棘球蚴(包蟲)抗體陰性。樣品OD450nm>0.3,判為細粒棘球蚴(包蟲)抗體陽性。樣品OD450nm處于0.3±0.02臨界值范圍內,建議重復檢測,以確保結果準確。3對細粒棘球蚴(包蟲)免疫保護力檢測結果的判定:樣品OD450nm≤0.3,判為無保護力,所檢樣品對細粒棘球蚴(包蟲)感染無保護力。樣品OD450nm介于0.3與0.6之間,判為保護力低下,抗體水平較低,對細粒棘球蚴(包蟲)感染有一定保護力。樣品OD450nm≥0.6,判為有保護力,所檢樣品抗體水平較高,在攻毒試驗中可提供高于90%的抵抗力。樣品OD450nm處于0.3±0.02或者0.6±0.02兩個臨界值范圍內,建議重復檢測,以確保結果準確。?【注意事項】1?本底過高可導致結果整體水平偏高,實驗過程需保證二抗清洗干凈,或實驗中添加空白對照。2?環境溫度低于15?C可導致結果整體水平偏低,實驗過程需保證環境溫度盡量接近25?C,或適當延長底物液顯色時間。3?底物液A和底物液B不要暴露于強光,避免接觸氧化劑。?4?濃縮洗滌液用去離子水稀釋,如果發現有結晶,應水浴加熱使其溶解。5?酶標二抗應現配現用。6?4?C過夜孵育樣品及酶標二抗可以獲得更好的結果。?【貯?存】?2~8?C避光保存?【有效期】?9個月【生產企業】?重慶澳龍生物制品有限公司【地?址】?重慶市榮昌縣昌元鎮昌州大道東段板橋四支路3-03????【郵?編】?402460【技術服務】?023-85261707?????????【銷售熱線】?023-85261703(傳真)
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        試劑盒類
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        詳細信息
        參數
        羊棘球蚴(包蟲)ELISA抗體檢測試劑盒    Indirect ELISA Kit For Echinococcus Granulosus 
         
        使用說明書
        【簡 介】
          試劑盒由抗原包被板、血清稀釋板、酶標二抗及其它試劑制成,應用間接ELISA法檢測羊血清中抗羊棘球蚴(包蟲)主要保護性抗原Eg95蛋白的抗體。
        【用 途】
          適用于養殖場及檢驗機構對羊棘球蚴(包蟲)病基因工程亞單位疫苗免疫效果的評價。
        【原 理】
          本試劑盒是采用棘球蚴主要保護性抗原EG95包被微孔板。在試驗中,若待測血清樣品中含有抗棘球蚴的特異性抗體,則將與檢測板上抗原結合形成抗原—抗體復合物。之后加入的酶標二抗將與檢測板上的抗原—抗體復合物發生特異性結合,再加入TMB底物溶液后形成藍色產物。顯色反應經終止液終止后呈黃色,最終通過測定450nm波長下吸光度即可得到結果。
        【試劑盒主要成分】 

        抗原包被板                  

        2                            96孔/

        陰性對照血清   

        1                            50μl /管

        陽性對照血清    

        1                            50μl /管

        酶標二抗   

        2管                            0.2ml/

        5 25倍濃縮洗滌液     

        1                            25ml/瓶

        底物液A          

        1                            10ml/瓶

        底物液B         

        1                            10ml/瓶

        終止液            

        1                            10ml/瓶

        樣品稀釋液    

        2                            30ml/瓶

        10血清稀釋板      

        2                            96孔/

        11說明書               

        1

         
        【樣品制備】
          取動物全血,按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血。
        【試劑配制】
          使用前,試劑盒內除酶標二抗外的各種試劑都應恢復到室溫(25?C左右)。25倍濃縮的洗滌液恢復至室溫或略微加熱后搖動使沉淀的鹽溶解,然后用去離子水作25倍稀釋,稀釋好的洗滌液在2~8?C可以存放7天。酶標二抗在使用前用樣品稀釋液按1:100倍稀釋,現配現用。
        【樣品稀釋】
          標準樣品與待檢樣品均在血清稀釋板中按1:50倍的體積稀釋(推薦稀釋方法:245μL樣品稀釋液中加5
        待檢血清樣品)。
        【操作步驟】 
        1、取抗原包被板,先加入50μL樣品稀釋液,再將稀釋好的待檢樣品和對照樣品各取50μL加入到抗原包被板孔中,用移液器輕輕吹打混勻。陰性對照和陽性對照各設2孔,置37?C溫育30分鐘。
        2、甩掉板中的溶液,每孔加入稀釋好的洗滌液200μL,靜置1分鐘倒掉,再在吸水紙上拍干,共洗3次。
        3、每孔加入稀釋好的 酶標二抗100μL,置37?C溫育30分鐘。
        4、甩掉板中的溶液,每孔加入稀釋好的洗滌液200μL,靜置1分鐘倒掉,再在吸水紙上拍干,共洗3次。
        5、每孔加入等體積混合好的底物溶液A 與底物溶液B 100μL ,避光顯色10分鐘。
        6、每孔加終止液50μL,10分鐘內測定450nm波長吸光度。
        【結果判定】 
          參考農業部關于印發《2013年國家動物疫病強制免疫計劃》的通知,被檢抗體正向間接血凝實驗抗體效價≥25為陽性。根據該通知制定結果判定標準:
         
        1 實驗結果同時滿足下列條件,方為有效:
        標準陽性對照孔平均OD450nm≥0.6±0.02。
        標準陰性對照孔平均OD450nm≤0.3±0.02。
        2 疫苗免疫后抗體水平檢測結果的判定:
        樣品OD450nm≤0.3,判為細粒棘球蚴(包蟲)抗體陰性。
        樣品OD450nm>0.3,判為細粒棘球蚴(包蟲)抗體陽性。
        樣品OD450nm處于0.3±0.02臨界值范圍內,建議重復檢測,以確保結果準確。
        3 對細粒棘球蚴(包蟲)免疫保護力檢測結果的判定:
        樣品OD450nm≤0.3,判為無保護力,所檢樣品對細粒棘球蚴(包蟲)感染無保護力。
        樣品OD450nm介于0.3與0.6之間,判為保護力低下,抗體水平較低,對細粒棘球蚴(包蟲)感染有一定保護力。
        樣品OD450nm≥0.6,判為有保護力,所檢樣品抗體水平較高,在攻毒試驗中可提供高于90%的抵抗力。
        樣品OD450nm處于0.3±0.02或者0.6±0.02兩個臨界值范圍內,建議重復檢測,以確保結果準確。
         
        【注意事項】
        1  本底過高可導致結果整體水平偏高,實驗過程需保證二抗清洗干凈,或實驗中添加空白對照。
        2  環境溫度低于15?C可導致結果整體水平偏低,實驗過程需保證環境溫度盡量接近25?C,或適當延長底物液顯色時間。
        3  底物液A和底物液B不要暴露于強光,避免接觸氧化劑。 
        4  濃縮洗滌液用去離子水稀釋,如果發現有結晶,應水浴加熱使其溶解。
        5  酶標二抗應現配現用。
        6  4?C過夜孵育樣品及酶標二抗可以獲得更好的結果。
         
        【貯  存】  2~8?C避光保存 
        【有 效 期】  9個月
        【生產企業】  重慶澳龍生物制品有限公司
        【地  址】  重慶市榮昌縣昌元鎮昌州大道東段板橋四支路3-03      
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        關鍵詞:
        抗體
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        血清
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